هناك أنباء كبيرة أخرى في مجال تحرير الجينات: بالأمس ، نشر فريق البروفيسور لو يو من مستشفى غرب الصين بجامعة سيتشوان بيانات أول تجربة سريرية لتحرير الجينات CRISPR في العالم - مما يؤكد أن الخلايا التائية المحررة باستخدام CRISPR-Cas9 يتم علاجها سريريًا في وقت متقدم سرطان الرئة وأمراض أخرى آمنة وقابلة للتنفيذ.
وأبلغوا عن نتائج التجربة السريرية الأولى للمرحلة الأولى من الخلايا التائية التي حررتها CRISPR Cas9 PD-1 في المرضى الذين يعانون من سرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة المتقدمة في المجلة العليا "Nature". أطروحة بعنوان "سلامة وجدوى الخلايا التائية التي تم تحريرها CRISPR في المرضى الذين يعانون من سرطان الرئة غير الخلايا الحرارية".
وخلص الباحثون إلى أن التطبيق السريري لخلايا T CRISPR-Cas9 المعدلة جينيا آمن وعمليا. يجب أن تستخدم التجارب المستقبلية طرقًا فائقة لتحرير الجينات لتحسين فعالية العلاج.
يمكن أن يؤدي جمع جينات CRISPR Cas9 المنقحة التي يتم تحريرها والمتباعدة بانتظام إلى تحسين فعالية العلاج بالخلايا التائية ، ولكن المهمة الأساسية هي فهم سلامة وجدوى هذه العملية ، تليها فعاليتها ، وتشمل الأهداف الاستكشافية تتبع الخلايا التائية المحررة.
يمكن تتبع هذه التجربة حتى يونيو 2016 - في ذلك الوقت ، أطلق فريق البروفيسور Lu You أول تجربة بشرية في العالم لعلاج CRISPR ، ولكن لا تزال هناك العديد من الشكوك حول سلامة CRISPR-Cas9 في التطبيقات السريرية.
الآن ، حققت تقنية تحرير الجينات CRISPR-Cas9 والعلاج المناعي للسرطان قفزات هائلة. اجتذب مثبط PD-1 المستخدم لمنع مسار PD-1 / PD-L1 انتباه فريق الأستاذ Lu You. هل يمكن تدمير PD-1 للخلايا التائية ، ثم يمكن نقل الخلايا التائية إلى المرضى مرة أخرى ، وذلك لتحقيق علاج سرطان الرئة المتقدم؟
ونتيجة لذلك ، بدأ الفريق دراسة سريرية على مرضى سرطان الرئة المتقدم الذي فشل في الشفاء لفترة طويلة ، ولم يحققوا نتائج بعد العلاجات المختلفة وانضموا إلى الدراسة كمتطوعين. في النهاية ، تم تضمين ما مجموعه 22 مريضا في الدراسة.
خلال التجربة ، استخدم فريق البحث Electroporation من Cas9 والبلازميدات RNA أحادية الاتجاه لإنتاج خلايا T المحررة PD-1 في المختبر عن طريق ترنسفكأيشن مشترك ، وبالتالي تدمير إكسون 2 من جين PD-1.
الشكل 1: رسم تخطيطي يوضح تدفق المريض وتصميم الدراسة ، بما في ذلك تسجيل المرضى ومجموعة الجرعات المخطط لها والتدخل والمتابعة وتقييم النتائج.
في التجربة ، لم يتلق 5 مرضى العلاج بسبب عدم كفاية توسع خلايا T في المختبر ، وحصل جميع المرضى الـ 17 الباقين على خلايا T نشطة للغاية (90 ). قبل إعادة إدخال الخلايا التائية المحررة ، أصيب شخصان بتطور المرض ، و 1 كان لديهم عدوى في الرئة ، وزاد 1 من التهاب المفاصل الروماتويدي ، وانسحب 1 من الدراسة طواعية. في النهاية ، تلقى 12 شخصًا علاج إعادة تسريب الخلايا التائية.
تم حقن هؤلاء الأشخاص البالغ عددهم 12 شخصًا ثلاث مرات باستخدام الخلايا التائية المحررة PD-1 في دورة مدتها 28 يومًا ، وكان متوسط عدد الخلايا التائية التي أرسلها كل مريض 133 مليونًا.
من التأثير الكلي ، فإن كفاءة التحرير الجيني ما بين 8.7 -31.2 ، والمتوسط هو 20.1 . في الخلايا التائية المحررة ، انخفض مستوى التعبير عن PD-1 بشكل كبير ، وكان معدل التدمير لـ PD-1 بين 33.7 -67 ، مع متوسط قيمة 46.3.
الشكل 2: تحرير الجين PD-1 بوساطة كريسبر- Cas9 في الخلايا التائية
كانت جميع الأحداث الضائرة المرتبطة بالعلاج من الدرجة 1/2. وشملت هذه الأحداث الضائرة قلة اللمفاويات (3 حالات) ، والتعب (3 حالات) ، نقص الكريات البيض (حالتان) ، والحمى (حالتان) ، وآلام المفاصل ( حالتان) وطفح جلدي (حالتان). يمكن الكشف عن الخلايا التائية المحررة في الدم المحيطي بعد التسريب. كان متوسط البقاء على قيد الحياة بدون تقدم 7.7 أسبوعًا (95 فاصل الثقة 6.9-8.5 أسابيع) ، وكان متوسط البقاء الكلي 42.6 أسبوعًا (95 فاصل الثقة 10.3-74.9 أسابيع). من خلال تسلسل الجيل التالي ، في 18 موقعًا مرشحًا ، كان متوسط معدل الطفرة للأحداث خارج الهدف 0.05 (النطاق 0-0.25 ).
البيانات الموسعة الشكل 2: الأحداث الضائرة المرتبطة بالعلاج ومدتها.
تبلغ كفاءة التحرير المتوسطة للخلايا التائية 5.81. بالمقارنة مع الخلايا التائية غير المحررة ، زادت نسبة CD8 و IFN-pos الإيجابيات المزدوجة في الخلايا التائية المحررة بشكل ملحوظ. هذا يشير إلى أنه بعد تدمير PD-1 للخلايا التائية ، يتم تحسين نشاط الخلايا التائية. من ناحية أخرى ، فإن نتيجة المعدل الوسطي خارج الهدف هو 0.05 ، وهو أقل بكثير من المعدل المستهدف الوسيط البالغ 1.69 - وبالتالي توصل الباحثون إلى استنتاج حول السلامة التشغيلية لخلايا T CRISPR-Cas9.
الشكل 3: تحليل الهدف مفقود من قبل NGS و WGS
اعتبارًا من 31 يناير 2020 ، كان جميع المرضى يعانون من تطور المرض. من بين 12 مريضاً ، توفي 11 (91.7) بسبب تطور الورم ، ولم تكن جميع الوفيات مرتبطة بالعلاج. المريض 1 المتبقي يتلقى العلاجات الأخرى.
سيتم نشر أي بيانات ومواد يمكن مشاركتها من خلال اتفاقية نقل المواد. سيتم تقديم جميع البيانات الأخرى التي تدعم نتائج الدراسة من قبل المؤلفين المعنيين عند طلب معقول حيثما أمكن.
تم تخزين بيانات التسلسل الأصلية لتقرير البحث في أرشيف تسلسل الجينوم البشري ( لمركز بيانات BIG التابع لمعهد بكين لعلم الجينوم بالأكاديمية الصينية للعلوم.
تجميع / الاقتصاديين المحتملين مجموعة معلومات APP
المصدر المرجعي: https://www.nature.com/articles/s41591-020-0840-5
https://science.sciencemag.org/content/367/6481/eaba7365
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31154919
